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BIACORE生物大分子相互作用仪

2018-01-22
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BIA(Biomolecular Interaction Analysis)提供了实时观察生物分子间相互作用的技术。通过它能观察两种分子结合的特异性,能知道两种分子的结合有多强,还能了解生物分子的结合过程共有多少个协同者和参与者。BIA可以让得到用其他技术方法难以得到的结果,因为它可以实时反映分子结合过程中每一秒变化的情况。无需借助标记物进行分析使BIA广泛应用于各类生物体系的测定,从各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞。BIA就是利用金属薄膜表面的折射率的改变,引起共振角的变化,来推断金属薄膜表面的变化。实验时先将一种生物分子固定在传感器芯片表面,将与之相互作用的分子溶于溶液流过芯片表面。检测器能跟踪检测溶液中的分子与芯片表面分子的结合、解离整个过程的变化。

    BIA技術是研究背景一项表明等阴阳离子振动(SPR)的电学光学仪器这种现象的微怪物传感器器分享技術。不要便用荧光标示和放射性同位素标示,才能确保了微怪物原子的天然冰灵活性。当入射光以临界状态角入喷到两个有差异 乳白色材质的界面显示时将形成全弯折角,且弯折角光密度在几大方面边上应想同,但若在材质表明镀一层合金聚酰亚胺膜后,根据入射光行促使合金中自由权光电的振动,才能导至弯折角光在一些的方面内大大的削弱,这其中使弯折角光根本消除的方面统称振动角。振动角会随合金聚酰亚胺膜表明凭借的液质的弯折角率的变动而变动,弯折角率的发展(RU)又和结合在一起在合金表明的大原子效率成比例。故而,BIA技術行凭借对反應全流程中多种原子弯折角光的消除领取初使的数据文件,并经想关治理领取毕竟-传感器器图。


    仪器介绍

BIA是英语"Biomolecular Interaction Analysis"的缩写,Biacore提供了实时观察生物分子间相互作用的技术。通过它您能观察两种分子结合的特异性,能知道两种分子的结合有多强,还能了解生物分子的结合过程共有多少个协同者和参与者。Biacore可以让您得到用其他技术方法难以得到的结果,因为它可以实时反映分子结合过程中每一秒变化的情况。无需借助标记物进行分析使Biacore广泛应用于各类生物体系的测定,从各类小分子化合物、多肽、蛋白质、寡核苷酸和寡聚糖直至类脂、噬菌体、病毒和细胞。Biacore是一个通用的仪器,因为您可以任意偶连如上所述任一种生物分子到传感片表面。因此要将Biacore应用在哪个领域,由您决定! 

Biacore是基于表面等离子共振(SPR)技术来实时跟踪生物分子间的相互作用,而不用任何标记物。实验时先将一种生物分子固定在传感器芯片表面,将与之相互作用的分子溶于溶液流过芯片表面。检测器能跟踪检测溶液中的分子与芯片表面的分子结合、解离整个过程的变化。 

Biacore系统的3个核心部分是传感器芯片,SPR光学检测系统,微射流卡盘。

    应用范围

1. 蛋白质功能分析与蛋白鉴定
2. 分子交互作用特性表征
3. 鉴定潜力药物标靶与诊断生物标志物
4. 细胞讯息传递机制探讨
5. 蛋白质结构与功能关系解析
6. 癌症、免疫调节、细胞凋谢机制及分子医学研究
7. 分子浓度测定
8. 结合位点图谱
9. 蛋白质体研究
10. 疫苗研发
11. 品管检测
12. 新药开发


    性能说明:

1.BIAcore生物分子相互作用分析系统是用在探测分子间相互作用的生物感测器,此技术可在不需任何标定物的真实状态下监视蛋白质、核酸、小分子药物、糖类等任何两种生物分子间相互结合、解离的情形。利用表面共振角度之原理,当偏极光照射到分子表面的时候即可侦测到表面共振角度的不同。

2. 核心技术简介:

  •             不需丝毫测量物的浅析方式 (Label-free analysis):BIAcore巧用表层能电浆共震(Surface Plasma Resonance,SPR)的光纤激光切割机的原里,立即侦测不起做用表层能上怪物原子核因相互间做用融入解离致使的安全性能调整,不先要做不起做用原子核纯化、及测量的忙乱子程序。
  •             自订的动物特男人的反响面上(Biospecific surface):必备条件多重反响片(Sensor Chips)或者炉火纯青的面上调整的方式(Surface Immobilization Methodology)运用者可面对反响原子核那个种类考虑适量的反响片,再凭借系统的内建的面上调整程式,製备相应的动物特男人的运用面上。
  •             超氢化物发生器试样英文诉求:BIAcore通过有趣设计的概念的超氢化物发生器液态物质汇流卡所要试样英文大小稀少(在5-100 μl)此外能准确的管控表现组建的打交道时间间隔与风速。
  •             迅速的剖析(Short analysis time):反应迟钝周期为2至一般都是10分钟左右。
  •             高灵敏度之侦测(High sensitivity detection):灵敏度依待测物之分子量而异,待测物分子量大于2000 Dalton,灵敏度高达10-9 - 10-12 M。

  •              同步侦测两个流路(Flow cell):BIACORE X的 IFC内具有两个反应槽,可做即时背景扣除(on-line background)

    操作流程

1. 样品准备 样品包括耦联到芯片表面的分子(ligand)和在溶液中流过的样品,称作analyte。如果ligand是小分子,要检查该分子结构上是否有可供耦联的氨基基团,如果没有需要考虑对分子进行修饰。
2. 缓冲液准备
该实验要求所有缓冲液都经过过滤和脱气处理。如果缓冲液能够耐受高温的话,可以对缓冲液进行灭菌处理。这样灭菌有脱气的效果,同时也能保存更长的时间。
3. 耦联 参照耦联的具体方法。
由于芯片表面带有负电,因此要耦联到芯片上的分子必须带上正电,才有利于分子吸附到芯片表面,以利于共价耦联反应的完成。预结合实验就是将样品溶解在不同PH值的缓冲液中,使其带上不同量的电荷。然后,将样品流过芯片表面,观察它与芯片的结合曲线,就可判断出合适的条件。
4. 测试
将分析物用合适的缓冲液稀释处理,上样。要尽可能让样品缓冲液与系统载流缓冲液一致。
5. 再生

    机体再生是将结合实际到心片表面能的分享物冲洗掉,方能心片的多次重复操作。
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