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美问必答之离子色谱:色谱柱性能下降怎么办?手性能分离吗?

2024-04-17
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在药物新药研发中,离子色谱技术被广泛运用于药物成分分析、含量检测、杂质控制等方面。离子色谱技术在药物研发中弥补的了常规色谱技术的不足,为药物质量控制和药物安全性评价提供了可靠的技术支持。通过离子色谱技术,药物研发人员能够更好地了解药物的成分和性质,有助于优化药物配方、改进生产工艺,从而提高药物的疗效和安全性。
近期,美迪西云讲堂CMC专题直播中,关于离子色谱的解读,收到了大家的热烈反馈和提问,本文为大家整理了直播中的高频问题和美迪西工艺分析部高级组长徐健的回答,希望能够帮助减少研发中的苦恼和困惑。

欢迎点击:观看离子色谱的抑制技术在药物分析中的应用直播回顾徐健老师的整场分享。关于新药研发的质量学研究方面,您还有什么困惑和感兴趣的话题吗?欢迎在文章最后留言。

离子色谱仪器.jpg

问:阴阴阳正离子方法,阳阴阳正离子方法,多见的淋洗液包括一些?我们的差异又分为是一些?

答:阴阳离子检测通常选用离子交换柱,当洗脱阴离子,我们主要使用氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠和碳酸氢钠等淋洗液。在阳离子体系中,例如,钠离子和甲离子需要使用酸性淋洗液,比较常用的有甲基磺酸和硝酸,这两种酸是常见的用于阳离子淋洗液。因此,在选择淋洗液时,需要根据具体情况选择碱性或酸性的淋洗液。对于酸根检测,需要使用碱性淋洗液;而对于阳离子检测,则使用酸性淋洗液。
此外,对于淋洗液的要求也很重要,需要选择较高级别的淋洗液以确保准确性。在手动配置阳离子淋洗液时,需要注意使用质谱级或者优级纯的硝酸或者甲磺酸配制淋洗液,不然可能会导致检测背景污染高的问题。

问:阴阳亚铁正离子价态各个留存和环境温度的关联是而且响应强度影响力吗?卤化物阴阳亚铁正离子的留存和阴阳亚铁正离子圆的半径有关的信息吗?

答:是的,反映传输速率应该会收到体温的关系到,若想关系到阴亚铁化合物的调取。介绍卤化阴亚铁化合物表面积的组成部分,可能内文有效仍未在我的PPT中风采展示。直播间中我介绍了了些经典传奇范例,浅议阴亚铁化合物调取的关系到的因素。阴亚铁化合物表面积越大,则其调取治疗功效越相关性。经过如图是范例,以氟阴亚铁化合物、氯阴亚铁化合物、溴阴亚铁化合物和碘阴亚铁化合物举例。这类阴亚铁化合物均会有同等电势数,但其阴亚铁化合物表面积开始不断增强。观测图形可出现 ,阴亚铁化合物表面积越大,在同等色谱情况下,其调取治疗功效越强。


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问:样品管理X-都不会穿过阳阴离子膜跟H+搭配吗?

答:在阳离子交换膜中,仅允许正电荷离子通过。这些负离子无法穿过阳离子半透膜,因此不会透过半透膜与氢离子结合,只有带正电荷的氢离子通过阳离子交换膜再与X-,如氯离子、溴离子或硝酸根离子结合形成相应的酸。

问:手性能分离吗?

答:手性区分的实际感觉并不志向。然而我国确定过测试那些包括手性型式的单质主要采用铁离子色谱使用区分,但区分实际感觉比较。故此会决定其它的的习惯的检验,词有CAD的检验器,可主要采用反相传统基本模式下的手性区分或CAD为的检验器的正相区分传统基本模式。

问:有木有有面临化合物色谱检侧仿品历程中,原子核量大化学物质过柱不出来了,出现气相色谱柱机械性能骤降,如聚乙二醇,怎么样去解決?

答:在实验中,您可以使用色谱再生功能,我们的体系是允许有机相存在的。如果您采用淋洗液发生器模式,可以将其断连并短接到色谱柱泵出口,然后直接连接至检测器,避免连接抑制器和淋洗液发生器。然后可以使用有机溶剂进行冲洗,比如使用50%乙腈水溶液再生。由于内部可能存在聚乙二醇导致无法洗脱,所以使用有机相清洗色谱柱。需要注意的是,清洗后,务必将色谱柱保存在淋洗液体系中,例如使用AS色谱柱、A系列色谱柱、阴离子色谱柱时,保存至少5毫摩尔氢氧化钠、氢氧化钾体系中,避免保存在水或其他有机相体系中。除此之外,柱效下降也可能是因为化合物的残留,如果有无法洗脱的问题出现,可以在序列做完后,通过有机项,例如50%或者30%乙腈进行洗脱。

问:现在的流动性相怎末选?

答:在常规实验中,公布的文献和方法中经常使用阴离子淋洗液,最常见的氢氧化钾或氢氧化钠。这两类淋洗液可以解决至少90%的阴离子检测。对于阳离子部分,常用的是甲基磺酸,是目前阳离子检测中最常见的淋洗液。当测试钾钠离子、钙镁离子以及铵根离子时,甲基磺酸是最常用的淋洗液液之一。

问:不分解的土样该如何进样的?

答:对于不容易溶解的样品,需要选择一个适合的稀释剂来溶解样品。比如可以选择有机试剂,如二甲亚砜(DMSO)、甲醇或乙腈等。先通过有机试剂溶解样品,在加入水或淋洗液稀释,通常的常规离子在第一次溶解后,不会再被化合物包裹或吸附,通常可以被检测到,从而不会影响回收率和检出量的准确性。主要注意,一般有机试剂的添加量不应超过5%,超过5%虽然可以,但是有机试剂添加量比较多,当样品进样后在纯水相体系中,样品可能会瞬间析出,出现堵塞进样针,六通阀、色谱柱甚至检测器的风险。所以最好不要超过5%,我们通常会使用1%或2%有机相。如果有用的多的情况下需要多多观察,查看有机试剂加入后会不会有大量的析出。

问:可能用多高标准有几相冲?会有害气相色谱柱?

答:根据文献,使用50%乙腈冲洗通常是可以的,但要注意不要保留在乙腈中,冲洗后应该用水相过渡,然后用淋洗液保存。例如,如果使用的是AS系列的柱子,假设测量完成后需要冲洗色谱柱,可以使用50%或30%的乙腈进行一定时间的冲洗。一般是20倍柱体积就可以认为冲洗干净。接着,可以用纯水进行过渡,之后再过渡到淋洗液中,比如氢氧化钾或氢氧化钠。


问:阳阴离子阻止器的期限更短,用到历程应该如何目光?

答:抑制器最怕干烧和样品的吸附,主要是抑制器中的半透膜比较脆弱,压力高、干烧和样品吸附较多的情况下半透膜会出现不可逆的损毁,建议采用外接循环水模式,不要使用检测器废液作为抑制器水;抑制器长期不用的情况下,每周冲洗一次。

问:能够抑制器预期及长期的手机截图用有什么水溶液?

答:短期的可以保存在淋洗液和超纯水中,注意区分好流路,每周冲洗一次;不建议长期保存,抑制器内如果干涸可能会造成损坏,如果已存在长期保存并没有做每周维护的这种,可以使用厂家的抑制器再生方法,使用前对抑制器再生,不要直接连接到仪器上使用。

 美迪西分析测试中心

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