一、原理
天然免疫公司化学工业系统工艺是基于抗原与抵抗能力特喜欢的人结合起来的原因，验测公司中的肽和蛋白酶质的另外一种系统工艺。现最常用下类这两种验测工艺：
SP法：
一抗 + 生态学素标签二抗 + 辣根酶标签链霉卵白素 + 辣根酶底物显色
SABC法：
一抗 + 生物制品工程素标出二抗 + SABC（链霉卵白素 + 辣根酶标出生物制品工程素） + 辣根酶底物显色
通常讲，SP法特异形较高，SABC法神经敏单纯较高。

免疫力组化决定性显色反映是经过酶与底物功用自动生成不无水磷酸氢色素沉着而完工的，选中用底物与呈色反映相互之间有关的。里常用的是DAB,呈棕黄至棕黄褐色乳浊液。 

抗体组化

二、材料和试剂
1.微生物培养基：医用酒精、二甲苯、枸橼酸盐、PBS、一抗、二抗微生物培养基盒、DAB、树胶等。
2. 议器设施： 载玻片、着色缸、湿盒、移液器、红外光炉、恒温性比较好箱、冷库、体视显微镜等。

三、染色程序
1.切成片脱蜡至水；二甲苯Ⅰ（14几1分种左右左右）→二甲苯Ⅱ（14几1分种左右左右）→无水工业工业乙酸乙酯Ⅰ（4几1分种左右左右）无水工业工业乙酸乙酯Ⅱ（2几1分种左右左右）→90%工业工业乙酸乙酯（2几1分种左右左右）→80%工业工业乙酸乙酯（2几1分种左右左右）→70%工业工业乙酸乙酯（2几1分种左右左右）→分馏水（2几1分种左右左右）。
2. 3% H2O2，环境温度10-20钟头，消灭内源性酶。(30% H2O2 1份+双蒸水9份分层自制新鲜毛肚) 
PBS洗2分×2次；
3.红外光处理：将切开渗入0.01M枸橼酸盐缓冲器液PH6.0）电渣炉或红外光炉升温至煮沸后无电可用，间距2～115分钟后，连续2～115分钟，饮水浴冷至环境温度，PBS洗215分钟×2次；
4.滴入正常值小羊血清敞开式液，恒温20钟头， 不洗，甩去多此一举液态。中医组织化与免疫抗体非特情人通过，降底历史背景染色剂；
5.滴入Ⅰ抗（沉淀液要合适的基数配制，滴入量要不同企业尺寸，1cmⅩ1cm尺寸40ul差不多），37℃1-2半小时或4℃留宿；PBS洗分之五钟×3次；
6.加入适量生态学素化二抗, 37℃或空调温度30秒钟，PBS洗5秒钟×3次；
7.加入适量生化试剂组合物，37℃或常温30半小时，PBS洗5半小时×3次；
8.DAB显色：食用DAB显色化学药品盒,室内温度显色，镜下调控发应耗时，通常情况下在两分钟的时间以上；
9.银行流水擦拭；
10.苏木精复染2多分钟；
11.账单流水蓝化1两min；
12.干箱烤干、二甲苯透明图片、碱性树胶封片，复制图层烤箱烤片。

四、注意事项
1.薄片要一定薄、平、无刀纹；
2.中滴加采血管要先甩去薄片PBS，就用吸水能力纸把机构周边的水吹干，控制抗原外流吸附，但不会干片。

免疫组化相关试剂：
振动模式组织切片外移液(PNBS): （10ml）
 终有机废气浓度：                          储液：
 10%NS(二抗种属日常动物界血清)       NS             1ml
 2%BSA                             10%BSA         2ml
 5%白砂糖                            20%白砂糖        2.5ml  
          +PBS PH7.4   to    10ml
 
MEMFA：（10ml） 
 终溶度：                          储液：
0.1M MOPS                         1M MOPS         1ml
0.1mM EGTA                        10mM EGTA       2ml
1mM MgSO4                         1M MgSO4        10μl
3.7%PFA                           10%PFA          3.7ml    
         +d2H2O     to    10ml
 
AP-CDS：(100ml)                             
 终质量浓度：                            储液：
      100mM Tris-Cl PH9.5                 1MTris-Cl PH9.5     10ml
      50mM MgCl                           1M MgCl             5ml
      100mM NaCl                          5M NaCl             2ml
      0.1% Tween-20                       Tween-20            100ml
      5mM levamisole                      1M levamisole       500ml                 
                                                         +d2H2O     to    100ml
 
HRP-CDS: (1ml)
(1)6.6ml H2O2 in 100ml 0.1M TB PH 7.5
(2)20ml DAB（0.05g/ml in d2H2O）+5ml(1)液+0.1M TB PH 7.5  to  1ml
 
10%多聚装修甲醛调配方式：(100ml)
称取10克多聚甲荃(SIGMA P6148)粉状，放置到250ml扇形瓶中，加盟80ml 1xPBS，加上盟5-6滴（1ml吸头）10N NaOH, 于65°C水浴中可溶性高，溶于水的3-4钟头，压根可溶性高，溶于水的后冷去至空调温度，修改ph值至7.4, 盐溶液定容至100ml，吸附后灌装成每管4ml 或8ml, 保护于-20°C。应用前将贮液放置到80°C水浴中可溶性高，溶于水的，1xPBS扑灭至4%，就能应用。(配好后4°C密闭式保护，24钟头内应用。)
    或直观专门配制4%PFA, 技巧同上（也可以不加NaOH促溶，则不要用调PH），配好后4°C封闭空间茶叶保存，24分钟内实用。 

0.5%明胶处理载玻片的办法：
800ml补救液：
1.分解4g 明胶和4g盐酸铬钾于 800ml d2H2O中，65°C热处理加热30min控制，使其分解（尽量不要使水溶液欢呼）
2.净化硫酸铜饱和溶液，并将硫酸铜饱和溶液在高温下拨置至50°C左右两边。
3.将玻片在液体中浸提3-4次。
4.将工作的玻片在室内温度下得夜使其蒸发器干，为以免积尘，用冷藏膜涵盖。
5.130°C烤干3几小时及以上。
6.非常干燥保存文档。
办理液采用后，能加入0.05%NaN3，4°C上传。下一阶段采用时将氢氧化钠溶液蒸汽加热至50°C就好。 

球蛋白胶调配技巧：
取鲜活卵清有力搅伴， 4°C过虑，清液下载等球体积无荧光甘油，再下载0.05%NaN3有力相混，灌装成每管1ml，-20 °C上传。 

荧光封颗粒剂（Mowiol）配置的方法：（约24ml）
将2.4g mowiol、6g甘油和6ml去亚铁离子水倒出 50ml 离心分离力分液漏斗，常温2小时内，甚至mowiol仍然长大以后变透明的。加12ml0.2M Tris buffer （pH 8.5），50°C（過夜），也许mowiol仍然析出。4000-5000 rpm 离心分离力20 minutes。分开包装成每管1ml，-20°C存储。