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PROTAC技术作用机制独特
- 1.PROTAC原子核经过之一新风系统的靶核球蛋白配体（POI Ligand）非特异聊天识別并融入靶核球蛋白，经过其另一个新风系统的E3泛素拼接酶配体（E3 Ligase Ligand）非特异聊天识別并融入E3 Ligase；
- 2.出现P O I - P R O T A C - E 3ligase三合分手后复合体；
- 3.在这儿恩贝益包覆体中，靶球核蛋清POI被E3 ligase泛素化体现，泛素化体现了的POI最后被球核蛋清酶体识別并溶解，以此缓和靶球核蛋清的功能模块
PROTAC技术在药物研发方面的优势
改变靶点的“不可成药性”（undruggable）
PROTAC的作用分子机制是通过泛素-蛋白酶体系统降解靶蛋白，并非通过竞争结合以封闭靶蛋白功能区而发挥蛋白功能抑制作用，因此PROTAC对靶蛋白识别结合区不一定非得是活性区，结合力也不一定必须是高亲和力；这使得一些缺乏高亲和力小分子结合的“不可成药性”靶蛋白变成“可成药性”;
高效性
传统小分子抑制剂通过竞争结合靶蛋白活性功能域而抑制靶蛋白功能，所需小分子的量往往较大；而PROTAC通过泛素-蛋白酶体系统降解靶蛋白以解除靶蛋白功能，故具有可循环使用性、用量低和高效性的特点。
无免疫原性
与抗体药物相比，PROTAC不会引发抗药抗体产生。
综上，PROTAC已成为药物研发领域的新兴利器，在国内外备受科研单位及药企所追捧。
美迪西PROTAC技术服务介绍
靶标蛋白PROTAC-POI的设计合成
美迪西汇总了当前流行的热门POI配体，不同组织类型的E3ligase配体，并且建立了含数百种连接分子的linker库。
此外，美迪西成熟的计算机辅助药物设计技术平台，大大提高PROTAC-POI的设计合成质量。
PROTAC-POI的体外筛选
HEK 293T稳转株肿瘤细胞（POI-EGFP）mtk量挑选
利用基因敲入技术构建的“内源蛋白-EGFP”293T稳转株细胞，对PROTAC分子进行高通量筛选，计算DC50。
Percentage reduction in POI-EGFP fusion protein levelWestern Blot（WB）
通过WB实验检测初筛到的PROTAC分子对靶标蛋白的降解能力，分析DC50值。
Fig. 2 Western Blot Images showing POI degradation by PROTAC-POI癌细胞毒副作用实验设计（CCK-8或CTG法）
检测上述筛选到PROTC-POI对癌细胞增殖抑制能力，分析IC50值。
策略检查
a. 检测PROTAC是否通过E3 CRBN对靶蛋白进行降解。
Fig. 2 Western Blot Images showing POI degradation by PROTAC-POI
b. 特异性检测：通过利用LC-MS/MS进行蛋白组学分析，确定PROTAC降解蛋白的特异性；利用KINOMEscan分析PROTAC对激酶结合的特异性。
Proteasome system mediates PROTAC-POI-induced POI Degradation肺部肿瘤上皮细胞的繁衍仰制现象
利用CCK-8或CTG法，检测PROTAC对肿瘤细胞的增殖抑制效果。
Proliferation inhibition effects of POI in the indicated cell lines at 120 h after treatment
PROTAC-POI的动物体内药效筛选
CDX小鼠肺部肿瘤3d模型
将相应癌种细胞系移植到裸鼠或NSG小鼠体内，建立皮下瘤或原位瘤模型，通过口服、灌胃或静脉给药，检测体外筛到的PROTAC-POI对鼠体内肿瘤生长的抑制效果。
PDX小鼠癌肿三维模型
将肿瘤组织以组织块的形式移植到NSG小鼠体内，这些肿瘤组织在NSG小鼠体内保持了原始肿瘤的生物学特征，与临床特征相似度更高。利用PDX小鼠模型检测PROTAC-POI对体内肿瘤生长的抑制效果。
PK/PD研究、药学分析、药物代谢动力学研究和安全性评价
对动物体内药效检测筛选得到的理想的PROTAC-POI进行PK/PD研究、药学分析、药物代谢动力学研究和安全性评价，并汇总实验结果和材料进行IND申报，以助力客户加快PROTAC-POI药物的研发进程。
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