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1.哪些类别药物药效要用细胞因子评估?
曹洋:目前我们在疫苗类项目做的细胞因子评估比较多,尤其是一些多肽和核酸类的疫苗。在动物实验阶段,会重点评估疫苗的免疫效果。例如检测IL - 2和干扰素等细胞因子的水平。这些检测指标能够有效反映疫苗是否成功激活免疫系统,从而为疫苗的安全性和有效性提供关键数据支持。
2.不同的细胞因子对应的阳性刺激物是否都用PMA或LPS就可以?
曹洋:对于大多数细胞因子的检测,PMA和LPS都是常用的刺激剂,其中LPS的应用范围可能更广泛一些。然而,对于个别细胞因子,刺激效果可能会存在差异。例如,对于TNF-α的检测,仅使用LPS或PMA可能刺激不足,此时可能需要使用特定的刺激剂,比如PMA + ionomycin(钙离子载体)或者CpG(一种寡核苷酸)等,这些刺激剂能够更有效地诱导细胞因子的产生。因此,具体的刺激剂选择需要根据细胞因子的类型进行针对性分析。
3.案例中流式检测细胞因子的方法与常规的流式检测有什么不同?
曹洋:检测方法的核心区别在于细胞刺激过程中会添加一种活性菌素。它的主要作用是阻止细胞因子从细胞内释放出来,从而便于后期的检测和固定。这种方法主要是用于检测细胞内的细胞因子。唯一的不同之处在于,它需要通过添加特定的试剂来限制细胞因子的分泌,确保其尽可能保留在细胞内,以便更准确地进行后续检测。
4. ELISPOT检测方面都测试过哪些样本和细胞因子?
曹洋:在ELISPOT检测中,最常用的样本是脾脏细胞。通常会在免疫后取出脾脏进行ELISPOT检测,也有使用血液样本或外周血单个核细胞(PBMC)进行检测的经验。至于细胞因子,我们主要集中在检测IL-2、IFN-γ和TNF-α。这几个细胞因子在免疫反应中具有重要的指示作用,是我们检测的重点指标。如果您对于新药研发临床前研究过程中有一些困惑或者想要深入了解的专题内容,可以评论区留下您的问题和建议,美迪西希望和您一起,探索新药研发的奇妙世界。