美研| CMC系列(九) 定量核磁那些事儿：定量核磁应用及其方法验证

2023-12-18

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开篇引言

核磁共振是基于特定原子核（主要为I=1/2的¹H、¹³C、¹⁵N、¹⁹F、³¹P等）在外磁场（1~21 Tesla，1 tesla=10⁴guass）中吸收了与其分裂能级间能量差相对应的射频场能量而产生共振的原理。核磁共振兼具定性分析及定量检测两种优势，广泛应用于化学、食品、药品等领域。

01 定量核磁原理与应用

参考值核磁技术设备（Quantitative Nuclear Magnetic，简写QNMR)最主要的是依托于1H-NMR，待测类无机化合物1H-NMR谱上各移动信息峰规则之比相当有效的质子数之比，肯定好好氢的积分查询规则值二者之间摩尔盐浓度成比例，参考值核磁技巧可氛围较为应参考值法和或然参考值法。较为应参考值法是QNMR中最轻松的，依据比效2种或2种这材料组成特征峰的峰面積来肯定好好的含碳量；或然参考值法是以组成和的含碳量如图所示的类无机化合物为按照，与待测物弄成盐溶液开始分析，依据比效二者之间的移动信息积分查询规则规则来肯定好好待测物的的含碳量，或然参考值法依据实验所技巧有所不同又可氛围内标法、外标法和规则加入到法。参考值核磁水平在药理学研究方向的软件有有以下工作方面：

▲反应过程监测
▲对照品赋值
▲原料药含量测定
▲药物制剂的含量测定
▲药物的杂质检查
▲化合物纯度检查
▲多组分纯度确定
▲代谢组学研究
▲聚合物组成研究等。

定量核磁原理与应用.jpg

02 药典法规要求

2010版国内药典二部附则中时需谈起核磁共震波谱法，2020版变成四部通则0441核磁共震波谱法。USP现今版、EP 10.8版、JP一8版和国内药典2025年版的NMR法通则信息内容比较如下图如下图所示表如下图所示。国内药典2025年版0441通则还有远离、NMR仪、核磁共震谱、测得策略步骤四部份。酶联免疫法分析一下中保证了绝对性酶联免疫法形式和相对而言酶联免疫法形式的供试品稀硫酸提纯策略步骤、测得策略步骤和测算公式计算，并扼要例举了要有考虑的试验性能参数的使用及整合产品。

内容

USP现行版<761>、<1761>

EP 10.8版2.2.33

JP 18版2.21

中国药典2020版0441

引言

简介、原理、适用范围

简介、原理

核磁仪器确认

DQ、IQ、PQ，系统适用性测试、确证测试

定义

共振、信号、波谱、模式、峰、线、跃迁

设备

磁体、探头(样品旋转、核磁共振管 )、控制台和计算机，仪器准备(磁体与场、探头调谐和匹配)

仪器组成(磁体、探头、控制台和计算机)、证明仪器正确工作的测试方法

FT-NMR波谱仪、连续波核磁共振(CW-NMR)波谱仪类型

仪器组成、仪器输出谱图的过程

测定方法

溶剂选择、样品处理

测定程序、样品处理

氢谱和碳谱的实验技术

溶剂选择、样品处理、样品检测

定性和定量分析

定性应用、定量应用(相对定量、绝对定量、外部校准、进一步的校准注意事项、一般程序、计量溯源性和标准物质的选择、样品制备、数据采集、数据处理、数据分析 )

定性分析、定量分析(内标法、规范化过程 )

定性和定量分析
•定性分析
•定量分析(绝对定量模式、相对定量模式)

采集参数

光谱宽度、停留时间、数据点数、采集时间、扫描次数、射频、接收器增益和脉冲宽度，后脉冲延迟，重复延迟

参数(脉冲宽度、死时间、采集时间、重复时间、接受增益 )

记录仪器和测定条件

采集后数据处理

增加信噪比或光谱分辨率、零填充、傅里叶变换定相、基线校正、采峰、积分、高级处理解

为定量目的优化采集和处理参数(数字分辨率、信噪比、整合区域、动态范围 )

NMR分析方法的验证和确认

生命周期方法的分析方法验证
•ATP
•第一阶段一方法设计 (分析方法开发、QRMMODR、复制策略、分析控制策略 )
•第二阶段一APPQ(APPQ程序、测量不确定度APPQ结果和文档)
•第三阶段一CPPV (日常监测、分析方法的变更)传统分析方法验证(准确度、精密度、专属性、工作范围、定量限、耐用性、溶液稳定性 )、分析方法确认

溶液核磁共振应用

结构解析和表征(示例 )、鉴别(示例)、定量(实验设计、样品制备、1D qNMR、2D qNMR )

使用化学位移、谱峰多重性和相对强度进行鉴别，使用标准品进行鉴别

SSNMR

MAS、高功率去耦和CP三种技术和应用

台式核磁共振仪

台式时域NMR仪、台式频域NMR仪、台式核磁共振应用