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开运电竞研发服务药物发现生物学结构生物学蛋白表达与纯化平台酵母菌蛋白表达系统

酵母菌蛋白表达系统

酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点，具备培养条件普通、生长速度快、成本相对较低、能进行蛋白翻译后加工、易获得可溶性活性重组蛋白等特点，被广泛用于重组蛋白尤其是真核蛋白的生产制备。其中巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）因其生长速度快、商业化表达载体丰富、可获得高效的分泌表达等优点，使其成为酵母表达重组蛋白的优先选择。

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服务质量该项目

美迪西科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台，提供优质的重组蛋白在毕赤酵母中的表达与纯化服务。

酵母表达系统服务项目:
重组方案酒曲表达出来质粒搭建；协同质粒电生成；重新组合体现子筛分；小投资额蛋白质表现和纯化（2L养成基养成终产物）；大市场规模蛋白酶表达方法和纯化（10L以内）。

工作操作步骤

步骤	实验内容	实验时间	备注
1	重组酵母表达质粒构建	2 周	可选择不同载体；不同亲和标签；分泌或胞内表达
2	重组质粒电转化	1周	不同表达菌株可选， PCR 鉴定5-10个克隆
3	重组表达子筛选	3-4周	5-10个克隆筛选， Zeocin抗生素浓度筛选重组子，结合Western blot 方法鉴定重组蛋白表达
4	小规模蛋白表达和纯化	2-4周	优化培养基，菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等
5	大规模蛋白表达和纯化	根据表达体积商定	可选择摇瓶或者发酵罐培养